Différences entre versions de « Biologie cellulaire »

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Choisir un agent de transfection tolérant au sérum lorsque cela est nécessaire
 
Choisir un agent de transfection tolérant au sérum lorsque cela est nécessaire
 
Certaines lignées cellulaires exigent la présence de sérum, il est donc nécessaire de vérifier la compatibilité de votre agent de transfection !.................                                                 
 
Certaines lignées cellulaires exigent la présence de sérum, il est donc nécessaire de vérifier la compatibilité de votre agent de transfection !.................                                                 
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:* Optimiser la quantité de cellules par puits
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Les cellules doivent atteindre une confluence de 50-80% le jour de la transfection.
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Il est généralement recommandé de partir de partir sur 106 cellules/essais (ou 5X105 pour une Boîte de Pétri traitée culture cellulaire Ø 60 mm, à adapter suivant la surface utilisée)
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Inclure un contrôle de transfection
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Des plasmides exprimant un gène rapporteur sont classiquement utilisés (luciférase, β-galactosidase, CAT …)
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Contrôler l’état de vos cellules !
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=> Assurez-vous que vos cellules sont en phase de prolifération et contrôlez également qu’il n’y ait pas de contamination (mycoplasmes, bactéries) avant votre transfection..................
 
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Version du 3 mai 2018 à 21:59


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  • .Les techniques de biologie cellulaire et moléculaire ont connu un formidable essor dans les sciences de la vie et leurs applications sont de plus en plus présentes en R & D pharmaceutique dans les domaines de la pharmacologie et de la toxicologie.

Les technologies d’analyse cellulaire et moléculaire sont utilisées à différents stades des processus de R & D notamment comme outil d’aide à la décision au développement de médicaments, dans des modèles de screening ou au cours du développement lui-même. Elles rendent possibles l’élucidation des mécanismes d’action des substances endogènes ou des candidats-médicaments sur l’organisme, mais aussi l’identification des déterminants moléculaires thérapeutiques (biomarqueurs)............................................................................... ................................................................................ ................................................................................ ................................................................................

  • On retrouve la PCR, en association avec d'autres techniques, dans la compréhension de la manière dont une cellule répond aux conditions extérieures – une problématique clé dans les études sur le contrôle de l'expression des gènes. Dans une cellule donnée, on estime que de 10 000 à 15 000 gènes sont susceptibles d'être exprimés chez l'homme et la plupart des mammifères (« expression » veut dire que ces gènes sont copiés – on dit sont transcrits – en ARN messagers).Le « paysage » constitué par ces ARN messagers est représentatif de l'état de différenciation de cette cellule (ce n'est pas le même pour une cellule musculaire ou pour un neurone), mais également de son état fonctionnel (par exemple soumis à un stress ou à une stimulation hormonale). Les profils d'expression des transcrits connaissent des variations qualitatives ou quantitatives qui reflètent la dynamique biologique de la cellule. ...............................................................................

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